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Probe

產品編號: 無
規格: 無
螢光修飾
應用:提供多樣的螢光標定選擇,並以 HPLC 純化保障樣品的純度,產品的應用範圍包括 sequencing、SNP、FISH 等。
修飾選擇: 5', 3'

詳細介紹

各種螢光標定物質的吸收波與釋放波簡表:
以下僅列出常用的螢光標定劑的最大吸收及釋放波,若您有個別需求,請與我們連絡。
修飾種類 吸收波長 Max. 釋放波長Max. 位置
6-FAM , FITC 494 nm 520 nm 5'-, 3'-
FITC-dT 494 nm 520 nm internal dT
TET 521 nm 541 nm 5'-
JOE 520 nm 548 nm 5'-; 3'-
Yakima Yellow 526 nm 548 nm 5'-
HEX 535 nm 553 nm 5'-
Cy3 547 nm 563 nm 5'-
TAMRA 555 nm 576 nm 5'-; 3'-
ROX 575 nm 602 nm 5'-; 3'-
Texas Red 595 nm 615 nm 5'-; 3'-
Cy5 646 nm 662 nm 5'-
Alexa Flour series 請詢問 5'-; 3'-
Quasar series 請詢問 5'-; 3'-


螢光分子的品管方法:

螢光標定引子經 HPLC 純化後,除了以 HPLC 確認純度外,也輔以 denaturing PAGE 確定分子大小,HPLC 儀器搭配的 photodiode array 可以偵測紫外光-可見光吸收光譜以確認螢光分子的種類。
  • 螢光分子未染色前在 UV 光的激發下會釋放出特定的顏色,FAM 為綠光,HEX 為黃光,TAMRA 為紅光。

 

fluoUpper: Fluorescent PAGE
Oligos with different fluorescent labeling were analyzed by denaturing PAGE. After electrophoresis, gel was excited by UV and photographed.
#1,3,5: HEX-oligos (yellow)
#2,4,6:FAM-labeled-oligos (green)
#7,8: TAMRA-oligos (orange)
Lower: PAGE stained with methylene blue.
M: oligo size markers.


紫外光-可見光吸收光譜圖,可鑑定螢光吸收光譜。不同的螢光物質會出現不同的圖譜。以下圖為例,應用於即時定量 PCR 之探針,左圖為 HEX-NFQ,在 535 nm 及 522 nm 出現最大吸收波,分別為 HEX 及 NFQ 之特性。若探針分子為FAM-TAMRA (右圖),其吸收光譜會出現不同圖形,在 494 nm 出現 FAM 之最大吸收波。